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ISOLAMENTO DE Salmonella DE PRODUTOS DE FRANGO E PERFIL DE
SUSCETIBILIDADE DOS ISOLADOS A ANTIMICROBIANOS
Salmonella ISOLATION FROM POULTRY PRODUCTS AND ANTIMICROBIAL
Rita de Cássia dos Santos da CONCEIÇÃO1, Andréa HENTGES1, Ângela Nunes MOREIRA2, Flávia
Aleixo VASCONCELLOS3, Ida Maria Ramos ÂNGELO3, José Beiro CARVALHAL2, José Antônio
Guimarães ALEIXO2,3, Cláudio Dias TIMM1*
1 Inspeção de Leite e Derivados, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas (UFPel), Pelotas,
2 Faculdade de Nutrição, UFPel, Pelotas, RS, Brasil.
3 Laboratório de Imunologia Aplicada, Centro de Biotecnologia, UFPel, Pelotas, RS, Brasil.
* Inspeção de Leite e Derivados, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, CEP 96010-900,
Pelotas, RS, Brasil.
E-mail:
[email protected] Autor para correspondência.
Salmonella Enteritidis tem sido o principal sorotipo causador de salmonelose. O uso de
antimicrobianos na prevenção e no tratamento dessa infecção, assim como a utilização destes
como promotores de crescimento, tem provocado o aparecimento de cepas resistentes. O
trabalho teve por objetivo investigar a presença de
Salmonella em produtos de frango e
verificar a resistência dos isolados frente a agentes antimicrobianos. Foram analisadas 120
amostras de produtos de frango, segundo metodologia preconizada pela Food and Drug
Administration.
Salmonella foi isolada de sete (5,83%) amostras e foram identificados quatro
sorotipos, Enteritidis, Newport, Derby e Agona. Enteritidis foi o sorotipo de maior
prevalência (71,4%). Trinta e seis (94,7%), 34 (89,5%), 32 (84,2%) e 32 (84,2%) isolados
foram sensíveis aos antimicrobianos cloranfenicol, norfloxacina, ciprofloxacina e ampicilina,
respectivamente. Trinta e três (86,8%) isolados foram resistentes ao ácido nalidíxico. Todos
os isolados (100%) foram sensíveis à ceftriaxona. Vinte e cinco isolados (65,8%) foram
resistentes à tetraciclina. Foram encontrados cinco (13,2%) isolados multirresistentes. A
fiscalização dos produtos de frango deve ser mais rigorosa, quanto a possível presença de
Salmonella. O aparecimento de cepas de
Salmonella resistentes a agentes antimicrobianos é
indicativo da necessidade de maior controle no uso desses fármacos.
Palavras-chave. Salmonella Enteritidis, sensibilidade a antimicrobianos.
ABSTRACT
Salmonella Enteritidis is the main cause of salmonellosis. The use of antimicrobials to
prevent and to treat this infection, as well their use like growth promoters, has induced the
emergency of resistant strains. The aim of this work was to search the presence of
Salmonella
in poultry products and to investigate the isolates resistance to antimicrobial agents. One
hundred and twenty samples of poultry products were analyzed, according to the Food and
Drug Administration.
Salmonella was isolated from seven (5.83%) samples and four
serotypes were identified, Enteritidis, Newport, Derby and Agona. Enteritidis was the most
prevalent serotype (71.4%). Thirty-six (94.7%), 34 (89.5%), 32 (84.2%) and 32 (84.2%)
isolates were susceptible to chloramphenicol, norfloxacin, ciprofloxacin and ampicillin,
respectively. Thirty-three (86.8%) isolates were resistant to nalidixic acid. All isolates (100%)
were susceptible to ceftriaxone. Twenty-five isolates (65.8%) were resistant to tetracycline.
Five isolates (13.2%) multiresistant were found. The inspection of poultry products must be
more rigorous, regarding to the possible presence of
Salmonella. The occurrence of
Salmonella strains resistant to antimicrobial agents is indicative of more control necessity in
Key words. Salmonella Enteritidis, antimicrobial susceptibility.
INTRODUÇÃO
Bactérias do gênero
Salmonella estão entre as principais causas de enfermidades
veiculadas por alimentos1. A transmissão desta bactéria a humanos ocorre pela ingestão de
carnes mal cozidas, leite, ovos e outros alimentos, como vegetais que são ingeridos crus após
sofrerem contaminação cruzada. Produtos e alimentos de origem animal são os principais
responsáveis pela distribuição mundial de salmonelose2. Dentre as fontes de contaminação de
Salmonella, as carnes são predominantes, tendo a de frango servido como veículo em
numerosos casos de infecções humanas3,4 .
Geralmente, a salmonelose é uma infecção autolimitante e não exige tratamento. No
entanto, infecções invasivas, incluindo septicemia e meningite, ocorrem em 5 a 10% dos
casos confirmados, principalmente entre crianças, idosos e pacientes com o sistema imune
comprometido5. O uso de antimicrobianos na prevenção e no tratamento dessas infecções,
assim como sua utilização como promotores de crescimento, tem provocado o aparecimento
de cepas resistentes6,7. Typhimurium e Newport são sorotipos de
Salmonella que têm
O trabalho teve como objetivo investigar a presença de
Salmonella em produtos de
frango e verificar a resistência dos isolados frente a agentes antimicrobianos.
MATERIAL E MÉTODOS
Amostras
Foram analisadas 120 amostras de produtos de frango (sobrecoxa, coxa e sobrecoxa,
coxinha da asa, carne moída, salsichão e fígado), conforme Tabela 1, adquiridas em
supermercados da cidade de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brasil, e encaminhadas ao
laboratório, sob refrigeração, onde foram analisadas até duas horas após o recebimento.
Isolamento e identificação
A pesquisa de
Salmonella foi realizada de acordo com a metodologia preconizada pela
Food and Drug Administration10. Nas amostras de sobrecoxa e coxinha da asa, o conteúdo
total da embalagem foi lavado em saco plástico estéril com 300 mL de caldo lactosado (CL,
Merck, Darmstadt, Germany), deixado em repouso por 30 min a temperatura ambiente e
incubado por 24 h a 37oC. Nas demais amostras, foi utilizado pré-enriquecimento com 25 g da
amostra em caldo lactosado por 24 h a 37oC. Foram analisadas três a cinco colônias de cada
amostra. Os isolados foram enviados ao Departamento de Bacteriologia do Laboratório de
Enterobactérias da Fundação Oswaldo Cruz (Fiocruz, Manguinhos, Rio de Janeiro) para
Teste de sensibilidade a antimicrobianos
O teste de sensibilidade a antimicrobianos foi realizado pelo Método de Difusão em
Disco, usando ágar Mueller-Hinton (Acumedia, USA) e incubação a 37°C por 18-24 h, de
acordo com o NCCLS11. Os antimicrobianos utilizados foram ampicilina (10mcg),
cloranfenicol (30mcg), norfloxacina (10mcg), tetraciclina (30mcg), ácido nalidíxico (30mcg),
ceftriaxona (30mcg) e ciprofloxacina (5mcg) (Sensidisc, DME, São Paulo). Foram realizados
antibiogramas nos isolados obtidos das amostras analisadas neste experimento e em 26
isolados de
Salmonella, obtidos de sete amostras de carne moída de frango, previamente
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Os resultados da pesquisa de
Salmonella nos produtos de frango estão demonstrados na
Tabela 1.
Salmonella foi isolada de 7 (5,83%) amostras e foram identificados quatro
sorotipos, Enteritidis, Newport, Derby e Agona. Enteritidis foi o sorotipo de maior
prevalência (71,4%) dentre os produtos de frango analisados, o que também tem sido
observado por outros autores, que têm relatado prevalência de
Salmonella mais elevada do
que a encontrada no presente estudo. Baú et al.13 analisaram 124 amostras de produtos de
frango obtidas em supermercados e açougues de Pelotas, Rio Grande do Sul, e isolaram
Salmonella de 10,48% das amostras, sendo o sorotipo Enteritidis predominante (77%) entre
os isolados. Matheus et al.14 analisaram 102 amostras de carcaças de frango resfriadas,
comercializadas no município de Bauru, São Paulo e isolaram
Salmonella de 6 amostras
(5,9%), sendo o sorotipo Enteritidis (66,7%) o mais isolado. Mayrhofer et al.15 identificaram
Salmonella em 16,4% de 281 amostras de carne de frango analisadas na Áustria. Antunes et
al.16 isolaram
Salmonella de 36 (60%) amostras de produtos de frango de um total de 60
coletadas na cidade de Porto, Portugal. Dez sorotipos foram identificados, sendo Enteritidis o
Tabela 1: Resultados da pesquisa de
Salmonella em 120 amostras de produtos de frango.
Produtos de frango
Amostras positivas/amostras
Sorotipos
analisadas
A presença de dois sorotipos em uma mesma amostra foi observada no presente
trabalho.
Salmonella Enteritidis e
Salmonella Agona foram identificadas em uma amostra de
salsichão de frango. A presença de mais de um sorotipo de
Salmonella em uma mesma
amostra também foi observada por Mayrhofer et al.15, que identificaram
Salmonella
Enteritidis e
Salmonella Heidelberg em uma amostra de carne de frango. Este fato salienta a
importância de serem enviados aos laboratórios de referência mais de um isolado para
sorotipagem, uma vez que a presença de mais de um sorotipo em uma mesma amostra pode
fornecer informações importantes quanto à epidemiologia da salmonelose.
Suscetibilidade à ampicilina, à ciprofloxacina, à norfloxacina, à tetraciclina, à
ceftriaxona, ao cloranfenicol e ao ácido nalidíxico foi investigada em todos os isolados. Os
resultados dos antibiogramas encontram-se demonstrados na Figura 1. Foram analisados 34
isolados, sendo oito identificados neste experimento. Trinta e dois (94,1%), 30 (88,2%), 28
(82,4%) e 28 (82,4%) isolados foram sensíveis aos antimicrobianos cloranfenicol,
norfloxacina, ciprofloxacina e ampicilina, respectivamente. Esses resultados foram similares
aos encontrados por outros pesquisadores13,17,18. Delicato et al.19, investigando o perfil de
resistência de 21 cepas de
Salmonella isoladas de infecções humanas, verificaram que 50%
dos isolados de
Salmonella Enteritidis apresentaram resistência a antimicrobianos, sendo o
maior percentual de resistência observado em relação à ampicilina (85,7%).
Sensível
Intermediário
Resistente
ero de isolados 15
úm 10
Ácido nalidíxico Norfloxacina Cloranfenicol Ceftriaxona Ciprofloxacina Tetraciclina
Antimicrobianos
Figura 1: Perfil de suscetibilidade de isolados de
Salmonella frente a antimicrobianos.
Trinta e um (91,2%) isolados foram resistentes ao ácido nalidíxico. Resistência a esse
antimicrobiano tem sido observada por outros autores15,16,20. No entanto, Carraminãna et al.17,
Fernandes et al.18 e Oliveira et al.21 verificaram mais de 90% de sensibilidade de
Salmonella
Todos os isolados (100%) foram sensíveis à ceftriaxona. Esses resultados são similares
aos observados por Baú et al.13, Delicato et al.19 e Stephen et al.22. Pickering23 analisou a
sensibilidade de 1.419 isolados de
Salmonella e 2% foram resistentes a ceftriaxona.
Cefalosporinas de terceira geração, como a ceftriaxona, são comumente empregadas no
tratamento de salmoneloses invasivas em crianças devido às suas propriedades
farmacodinâmicas e à baixa prevalência de resistência encontrada frente a esses
A tetraciclina tem sido um dos antimicrobianos mais utilizados em animais de
produção16,21, porém, em medicina humana, é considerada uma droga de segunda escolha15.
Vinte e cinco isolados (65,8%) foram resistentes à tetraciclina, sendo que 19 apresentaram
apenas resistência parcial. Fernandes et al.18, Oliveira et al.21 e Pickering23 identificaram 23%,
20% e 15,4%, respectivamente, de
Salmonella resistentes à tetraciclina.
Neste trabalho, um isolado foi considerado multirresistente quando apresentou
resistência a três ou mais antimicrobianos. Foram encontrados cinco (13,2%) isolados
multirresistentes, sendo que um (2,6%) foi resistente a cinco antimicrobianos, ampicilina,
norfloxacina, tetraciclina, ácido nalidíxico e ciprofloxacina, e dois (5,3%) foram resistentes a
seis dos antimicrobianos testados, ampicilina, cloranfenicol, norfloxacina, tetraciclina, ácido
CONCLUSÕES
A fiscalização dos produtos de frango oferecidos ao consumo humano deve ser mais
rigorosa, quanto a possível presença de
Salmonella. A ocorrência de
Salmonella
multirresistentes a antimicrobianos em produtos de frango potencializa o perigo representado
pela presença desse patógeno em alimentos. O aparecimento de cepas de
Salmonella
resistentes a agentes antimicrobianos é indicativo da necessidade de maior controle no uso
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Casus 8 fase B Titel casus Hartkloppingen Docenten Drs. S. Zeisser, huisarts Dr. J.R. de Groot, cardioloog in opleiding Technisch verantwoordelijke Drs. J.P.A. Broeren Ziektebeeld 70- jarige man die zich bij de huisarts meldt met hartkloppingen, die hij nog nooit eerder heeft gehad. De voorgeschiedenis van patiënt bestaat uit COPD en hypertensie. De casus begint als pat